ಮರುಸಂಯೋಜಕ ಸ್ಪೈಕ್ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ನ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಪೊರ್ಸಿನ್ ಅಕ್ಯೂಟ್ ಡಯೇರಿಯಾ ಸಿಂಡ್ರೋಮ್ ಕೊರೊನಾವೈರಸ್ IgG ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಪರೋಕ್ಷ ELISA ವಿಧಾನದ ಅಭಿವೃದ್ಧಿ

Porcine Acute Diarhea Syndrome ಕೊರೊನಾವೈರಸ್ (SADS-CoV) ಹೊಸದಾಗಿ ಪತ್ತೆಯಾದ ಪೊರ್ಸಿನ್ ಎಂಟರಿಕ್ ರೋಗಕಾರಕ ಕೊರೊನಾವೈರಸ್ ಆಗಿದ್ದು ಅದು ನವಜಾತ ಹಂದಿಮರಿಗಳಲ್ಲಿ ನೀರಿನಂಶದ ಅತಿಸಾರವನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡಬಹುದು ಮತ್ತು ಹಂದಿ ಉದ್ಯಮಕ್ಕೆ ಗಮನಾರ್ಹ ಆರ್ಥಿಕ ನಷ್ಟವನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡಬಹುದು.ಪ್ರಸ್ತುತ, SADS-CoV ಸೋಂಕು ಮತ್ತು ಲಸಿಕೆಯ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿತ್ವವನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲು ಯಾವುದೇ ಸೂಕ್ತವಾದ ಸೆರೋಲಾಜಿಕಲ್ ವಿಧಾನವಿಲ್ಲ, ಆದ್ದರಿಂದ ಈ ಕೊರತೆಯನ್ನು ಸರಿದೂಗಿಸಲು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ಕಿಣ್ವ-ಸಂಯೋಜಿತ ಇಮ್ಯುನೊಸಾರ್ಬೆಂಟ್ ಅಸ್ಸೇ (ELISA) ಅನ್ನು ಬಳಸುವ ತುರ್ತು ಅವಶ್ಯಕತೆಯಿದೆ.ಇಲ್ಲಿ, ಮಾನವ IgG Fc ಡೊಮೇನ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಬೆಸೆಯಲಾದ SADS-CoV ಸ್ಪೈಕ್ (S) ಪ್ರೊಟೀನ್ ಅನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ ಮರುಸಂಯೋಜಕ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಅನ್ನು ಮರುಸಂಯೋಜಕ ಬ್ಯಾಕುಲೋವೈರಸ್ ಅನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ನಿರ್ಮಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು HEK 293F ಜೀವಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ.S-Fc ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅನ್ನು ಪ್ರೋಟೀನ್ G ರಾಳದೊಂದಿಗೆ ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಮಾನವ ವಿರೋಧಿ Fc ಮತ್ತು ವಿರೋಧಿ SADS-CoV ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳೊಂದಿಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕತೆಯನ್ನು ಉಳಿಸಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ.ನಂತರ S-Fc ಪ್ರೊಟೀನ್ ಅನ್ನು ಪರೋಕ್ಷ ELISA (S-iELISA) ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲು ಮತ್ತು S-iELISA ಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳನ್ನು ಉತ್ತಮಗೊಳಿಸಲು ಬಳಸಲಾಯಿತು.ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ, ಇಮ್ಯುನೊಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಅಸ್ಸೇ (IFA) ಮತ್ತು ವೆಸ್ಟರ್ನ್ ಬ್ಲಾಟಿಂಗ್‌ನಿಂದ ದೃಢೀಕರಿಸಿದ 40 SADS-CoV ಋಣಾತ್ಮಕ ಸೆರಾಗಳ OD450nm ಮೌಲ್ಯವನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸುವ ಮೂಲಕ, ಕಟ್-ಆಫ್ ಮೌಲ್ಯವನ್ನು 0.3711 ಎಂದು ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಯಿತು.S-iELISA ರನ್‌ಗಳ ಒಳಗೆ ಮತ್ತು ನಡುವಿನ 6 SADS-CoV ಧನಾತ್ಮಕ ಸೆರಾದಲ್ಲಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸದ ಗುಣಾಂಕ (CV) ಎಲ್ಲಾ 10% ಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ.ಕ್ರಾಸ್-ರಿಯಾಕ್ಟಿವಿಟಿ ಪರೀಕ್ಷೆಯು S-iELISA ಇತರ ಪೋರ್ಸಿನ್ ವೈರಸ್ ಸೆರಾದೊಂದಿಗೆ ಯಾವುದೇ ಅಡ್ಡ-ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿಲ್ಲ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ.ಇದರ ಜೊತೆಗೆ, 111 ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ಸೀರಮ್ ಮಾದರಿಗಳ ಪತ್ತೆಯ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ, IFA ಮತ್ತು S-iELISA ಯ ಒಟ್ಟಾರೆ ಕಾಕತಾಳೀಯ ದರವು 97.3% ಆಗಿತ್ತು.ಸೀರಮ್‌ನ 7 ವಿಭಿನ್ನ OD450nm ಮೌಲ್ಯಗಳೊಂದಿಗೆ ವೈರಸ್ ನ್ಯೂಟ್ರಲೈಸೇಶನ್ ಪರೀಕ್ಷೆಯು S-iELISA ನಿಂದ ಪತ್ತೆಯಾದ OD450nm ಮೌಲ್ಯವು ವೈರಸ್ ನ್ಯೂಟ್ರಲೈಸೇಶನ್ ಪರೀಕ್ಷೆಯೊಂದಿಗೆ ಧನಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ.ಅಂತಿಮವಾಗಿ, S-iELISA ಅನ್ನು 300 ಪಿಗ್ ಫಾರ್ಮ್ ಸೀರಮ್ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಯಿತು.ಇತರ ಪೋರ್ಸಿನ್ ಎಂಟ್ರೊವೈರಸ್‌ಗಳ ವಾಣಿಜ್ಯ ಕಿಟ್‌ಗಳು SADS-CoV, TGEV, PDCoV ಮತ್ತು PEDV ಯ IgG ಧನಾತ್ಮಕ ದರಗಳು ಕ್ರಮವಾಗಿ 81.7%, 54% ಮತ್ತು 65.3% ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ., 6%, ಕ್ರಮವಾಗಿ.S-iELISA ನಿರ್ದಿಷ್ಟ, ಸೂಕ್ಷ್ಮ ಮತ್ತು ಪುನರುತ್ಪಾದಕವಾಗಿದೆ ಎಂದು ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ತೋರಿಸುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಹಂದಿ ಉದ್ಯಮದಲ್ಲಿ SADS-CoV ಸೋಂಕನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಬಳಸಬಹುದು.ಈ ಲೇಖನವನ್ನು ಹಕ್ಕುಸ್ವಾಮ್ಯದಿಂದ ರಕ್ಷಿಸಲಾಗಿದೆ.ಎಲ್ಲ ಹಕ್ಕುಗಳನ್ನು ಕಾಯ್ದಿರಿಸಲಾಗಿದೆ.